Lyofilisering, også kendt som frysetørring, er en proces der anvendes til konservering af biologisk materiale ved at fjerne vand fra prøven, som først indebærer, at prøven fryses og derefter tørres, under et vakuum, ved meget lavt temperaturer. Lyofiliserede prøver kan opbevares meget længere end ubehandlede prøver.
Hvorfor anvendes frysetørring?
Lyofilisering eller frysetørring af bakteriekulturer, stabiliserer kulturerne til langtidsopbevaring samtidig med at minimere den skade, der kan være forårsaget af strengt tørring af prøven. Mange mikroorganismer overlever godt, når de lyofiliseres og kan let rehydratiseres og dyrkes i kulturmedier efter længere tids opbevaring.
Lyofilisering anvendes også i bioteknologi og biomedicinske industrier til konservering af vacciner, blodprøver, oprensede proteinerog andet biologisk materiale.
Denne korte laboratorieprocedure kan bruges med enhver kommercielt tilgængelig frysetørrer for at bevare din kultursamling.
Processen
Processen med frysetørring er faktisk en anvendelse af et fysisk fænomen kaldet sublimering: overgangen af et stof fra fast stof til en gasformig tilstand uden først at passere gennem væsken fase. Under lyofilisering fjernes vandet i den frosne prøve som vanddamp uden først at optø prøven.
Almindelige fejl
En af de mest almindelige fejl, når det kommer til lyofilisering, er ikke at kende din prøves smeltepunkt, hvilket gør det vanskeligt at vælge den rigtige lyofilisator. Dine prøver kan smelte under processen. En anden almindelig fejl er at tænke, at koldere er bedre, når frysetørring på en hyldetype frysetørrer. Under primær tørring skal du indstille hyldetemperaturen til lige under prøveens eutektiske temperatur. Der skal være lige nok varme til at tilskynde molekylerne i prøven til at bevæge sig - men forhindre smeltning.
En tredje fejl er at bruge det forkerte udstyr til dine prøver. Da frysetørrere bruges i en gruppeindstilling, skal du vide følgende, før du køber en:
- Hvor meget fugt der lyofiliseres
- Hvad prøven er (og den eutektiske temperatur)
- Sådan bruges frysetørreren korrekt
Hvis enheden ikke bruges korrekt, kan det ødelægge alle prøverne. Hvilket bringer os til en anden almindelig fejl: At ikke vedligeholde vakuumpumpen. Pumpen skal være i fremragende funktionsdygtig tilstand for at lyofilisering kan fungere. Kørsel af pumpen med gasballast åben 30 minutter før og efter frysetørringsprocessen øger pumpens levetid. Åbning af gasballasten renser forurenende stoffer ud af pumpen for at forhindre beskadigelse af interne komponenter. Kontroller ofte pumpeolien for misfarvning og partikler og skift olien efter behov. Regelmæssige olieudskiftninger holder pumpen ved optimal vakuum under frysetørringsprocessen.
Endelig kan det være en stor fejl at have det forkerte tilbehør til frysetørring til din lyofiliseringsproces. Har du brug for en stopprøve under dit vakuum? Derefter kræves et stopkammer. Er du frysetørring i kolber? Sørg så for at have et tørrekammer med porte.
Ved at undgå ovenstående fejl kan du give bedre pleje af din frysetørrer og pumpe og få bedre prøver, når din frysetørring er færdig.
Referencer
Labconco News. "Top 5 fejl begået i lyofiliseringsprocessen."